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    測定吳茱萸醇提物中4種生物堿的過程分析

    返回列表 來源:未知 發布日期:2019-09-05 14:10【

    吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸、石虎或疏毛吳茱萸的 干燥近成熟果實。吳茱萸性味辛、苦、熱,有小毒; 具 有散寒止痛、降逆止嘔、助陽止瀉等功效。現代研究表 明,吳茱萸中含有多種化學成分,主要為生物堿類、檸檬 苦素類、揮發油類、木脂素、黃酮、多糖等,其中生物堿 類為其主要有效成分,具有鎮痛、抗炎等藥理作用。



    1 儀器與試藥

    1.1 儀器


    Agilent 1260 series 高效液相色譜儀( 包括 四元泵、自動進樣器、柱溫箱、DAD 檢測器) ; Mettler AE 240 電子天平( 瑞士 Mettler 公司,感量: 0.000 1 g) ;PS-80A 超聲波清洗機( 東莞市潔康超聲波設備有限公司) ; GZX-9140MBE 電熱鼓風干燥箱( 上海博迅實業有限公司醫療設備廠) ; 116B 搖擺式高速中藥粉碎機 ( 瑞安市永歷制藥機械有限公司) 。



    1.2 試藥

    吳茱萸藥材采自江西省新干市,經江西中 醫藥大學曹嵐副教授鑒定為蕓香科植物石虎的 干燥近成熟果實。去氫吳茱萸堿對照品購自上海源葉 生物科技有限公司( 批號: B21028) ,吳茱萸新堿對照品 購自上海胤珂生物科技有限公司( 批號: 15266-38-3) ,吳 茱萸堿對照品( 批號: 110802-200504) 、吳茱萸次堿對照 品( 批號: 0801-9702) 購自中國食品藥品檢定研究院。 所有對照品標示含量均大于 98.5%( HPLC 分析) 。乙 腈為色譜純,水為雙蒸水,其他試劑均為分析純。



    2 方法與結果

    精密稱取各對照品適量,以 甲醇溶解并定容,得單一成分對照品溶液。再分別取上 述 4 個對照品溶液各 1 mL 加入 10 mL 量瓶中,以甲醇 定容,搖勻,得混合對照品儲備溶液。混標溶液中,各對 照品的濃度分別為: 去氫吳茱萸堿 503 μg·mL-1 、吳茱 萸堿 501 μg·mL-1 、吳茱萸次堿 503 μg·mL-1 和吳茱萸 新堿 511 μg·mL-1 。吳茱萸藥材凈制,放入60 ℃ 烘箱,烘 2 h,粉碎,稱取約 0.3 g( 過孔徑 355 μm 篩) ,置 于具塞錐形瓶中,精密加入 70%乙醇 25mL,稱定質量, 浸泡 1 h 后超聲處理( 功率 100 W,頻率 40 kHz) 40 min, 放冷,再稱定質量,用 70%乙醇補足減失的質量,搖勻, 濾過,取續濾液,過孔徑 0.22 μm 濾膜,備用。將混合對照品 溶液、供試品溶液和空白溶劑分別按照“2.3”項下色譜 條件分別進樣檢測。可知,空白溶劑在 去氫吳茱萸堿峰、吳茱萸堿峰、吳茱萸次堿峰和吳茱萸 新堿峰位置處均無吸收峰,即溶劑對測定無干擾; 供試 品溶液中,4 種組分峰均與其他組分峰達到基線分離, 分離度>1.5,且與混合對照品溶液中 4 種組分峰的保 留時間一致。精密吸取供試品溶液 5 μL,按 “2.3”項下色譜條件連續進樣 6 針,以峰面積計算 RSD 值,得去氫吳茱萸堿、吳茱萸堿、吳茱萸次堿、吳茱萸新 堿的 RSD 值分別為 0.7%,0.6%,0.5%,0.8%。



    3 討論

    本實驗考察乙腈-0. 2%甲酸溶 液、乙腈-0.2%醋酸溶液和乙腈-0.1%磷酸溶液,發現在 乙腈-0.1%磷酸溶液下 4 種成分的色譜峰分離效果較 好,可達到完全分離,且出峰時間適中。因此選用了乙 腈-0.1%磷酸溶液為本實驗的流動相。吳茱萸生物堿是脂溶性化合 物,易溶于有機溶劑,如乙醇、甲醇、乙酸乙酯溶液等。 從環境友好和經濟適用的角度看,乙醇是最佳的提取 溶劑。前期實驗表明吳茱萸生物堿進行提取用濃 度為 70%的乙醇,生物堿得率最高。因此,本實驗使 用的提取溶劑為 70%乙醇。



     


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