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    己酸菌的分離篩選分析(博迅MJX-250C使用)

    返回列表 來源:未知 發布日期:2020-04-14 10:21【

    1 材料與方法 


    1.1 材料與試劑


    老窖泥(1# 、2# 、3# ):某老酒廠優質大曲酒發酵池乙醇醋酸鈉培養基:乙酸鈉0.5%,磷酸氫二鉀0.04%, 硫酸鎂0.02%,硫酸銨0.05%,酵母膏0.1%,調節pH至7.0,121 ℃高壓蒸氣滅菌20 min,接種前加入無水乙醇2%。


    1.2 儀器與設備 


    SW-CJ-ZFD雙人單面潔凈工作臺:蘇州蘇潔凈化設備 有限公司;MJX-250C立式恒溫培養箱:上海博迅實業有限公司醫療設備有限公司;LDZX-75KB立式壓力蒸汽滅菌 鍋:上海申安醫療器械廠;ALC-1104電子天平:賽多利斯科 學儀器有限公司;Agilent 6820氣相色譜(gas chromatography, GC)儀:美國安捷倫公司;DHG-9071A電熱恒溫干燥箱:上 海精宏實驗設備有限公司;722E可見分光光度計:上海光 譜儀器有限公司;LEICA電子顯微鏡:德國LEICA公司;DK98-II雙列八孔電熱恒溫水浴鍋:天津市泰斯特有限公司; C1000 Touch聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)儀:美國伯樂公司。


    2 結果與分析


    隨著發酵溫度的升高,菌株A-3的己酸含量呈先升高后下降 的趨勢。當發酵溫度為37 ℃時,己酸含量最高,為8.17 g/L。 當發酵溫度低于11 ℃或高于57 ℃時,則幾乎不產己酸,故 最適發酵溫度為37 ℃,溫度耐受范圍為13~55 ℃。


    3 結論 


    通過對老窖泥的多次富集培養,從3# 老窖泥中篩選得 到3株高產己酸的菌株A-1、A-3和A-5,己酸產量分別為 5.73 g/L、9.77 g/L、7.45 g/L。通過形態觀察及分子生物學技 術鑒定3株菌株均為克魯維氏梭菌(Clostridium kluyveri)。 其中Clostridium kluyveri A-3己酸產量最高,對其發酵性能 進行測定。結果表明,Clostridium kluyveri A-3在22 h后進入 對數期,80 h后進入穩定期,其產己酸的最佳初始pH值為 7.0,發酵時間為14 d,發酵溫度為37 ℃,乙醇含量為2%,pH 耐受范圍為3.0~11.0,乙醇最高耐受含量為5%,溫度耐受 范圍為13~55 ℃。






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