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    纖維細胞增殖分析

    返回列表 來源:未知 發布日期:2020-04-07 09:31【

    1 材料與方法 


    1.1 細胞株與藥物 


    人胚胎皮膚成纖維細胞株(CCC-ESF-1,編號 : BNCC339675)購自北京北納創聯生物技術研究院, 美洲大蠊提取物(乙醇提取)Ento-A(黃褐色濃稠 膏狀)、Ento-B、Ento-C 和 Ento-D(褐色濃稠膏狀)、 Ento-E( 黃 褐 色 凍 干 粉 末 )、Ento-F( 褐 色 液 體 ) 為云南省昆蟲生物醫藥研發重點實驗室自制。 


    1.2 試劑與耗材 


    H-DMEM 培養基(美國 Gibco 公司),碳酸氫鈉 (NaHCO3)、Hepes(北京索萊寶科技有限公司),胎 牛血清(美國 Gibco 公司),0.25% 胰蛋白酶(美國 Millipore 公司),噻唑藍(MTT)、二甲基亞砜(DMSO) ( 美 國 Sigma 公 司 ), 雙 抗 青 鏈 霉 素 混 合 液( 美 國 Millipore 公司),磷酸鹽緩沖液(PBS)(美國 Hyclone 公司)。 


    1.3 儀器 


    低速離心機(SC-2546)(安徽中科中佳科學儀 器有限公司),多功能酶標儀(Spectra Max M2)(美國 Molecular Devices 公司),立式壓力蒸汽滅菌器(YXQ-LS-50SII)(上海博迅實業有限公司醫療設備廠),電熱 恒溫水浴鍋(HWS-12 型)(上海一恒科技有限公司), 水套式二氧化碳培養箱(美國 Thermo 公司),潔凈工 作臺(SW-CJ-1FD)(蘇凈集團蘇州安泰空氣技術有 限公司),冰箱(BCD-232MB/A)(廣東容聲電器股份 有限公司),立式超低溫保存箱(DW-86L386)(青島 海爾股份有限公司)。


    2 結果


    低倍光學電子顯微鏡下觀察可見,陰性對照組 CCC-ESF-1 細胞似長梭形或三角形,生長狀態良好。 30 μg/ml 美洲大蠊提取物 Ento-C 作用細胞 24 h 后,細 胞狀態較陰性對照組無變化。3 μg/ml 美洲大蠊提取物 Ento-B、Ento-E 和 300 μg/ml 美洲大蠊提取物 Ento-F 分別作用細胞 24 h 后,與陰性對照組比較,細胞數有少 量減少,細胞形態有皺縮,發生變形,三者細胞狀態相 似。10 μg/ml 美洲大蠊提取物 Ento-D 作用細胞 24 h 后, 細胞數有一定減少,細胞形態皺縮,間隙變大,棱角變 鈍,散布存在。3 μg/ml 美洲大蠊提取物 Ento-A 作用 細胞 24 h 后,細胞數變少明顯,細胞形態變短,細胞纖 維樣逐漸消失,甚至可以看到漂浮的細胞。


    3 討論 


    瘢痕形成和創面愈合機制是一個相當復雜的生物 學過程,其機制尚未完全清楚,一般認為增生性瘢痕的 成因來源于成纖維細胞的生物學特性異常,由于成纖 維細胞增殖、生長失控,膠原過度沉積導致真皮纖維 化。增生性瘢痕的治療方法有中藥療法、抗腫瘤藥治療、 手術治療、壓力治療、放射治療、激光治療、基因治 療等,目前尚無特效的治療方法。盡管增生性瘢痕屬 于良性病變,但由于影響體表美觀,關節部位的瘢 痕還可影響關節活動,降低生活質量,易復發,因此是 目前臨床上亟待解決的課題。






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