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    黃芪堿溶多糖的提取-博迅水浴鍋使用

    返回列表 來源:未知 發布日期:2019-12-27 10:14【

    黃芪(Astragalus membranaceus),又名綿芪,為豆 科(Leguminosae)黃芪屬(Astragalus)多年生草本植物,主要產于內蒙古、甘肅、黑龍江和山西等地。黃 芪多糖是黃芪藥用部分的主要活性物質之一,可作 為免疫促進劑或調節劑,同時具有抗衰老、抗氧化、 抗炎、抗腫瘤及提高免疫力等多重功效。


    1 材料和方法 


    1.1 試驗材料 


    黃芪購于黑龍江省大慶市讓胡路區普濟康復醫 院藥房。 黃芪烘干→粉碎→過 80 目篩(直徑 0.180 mm)→粉末→真空干燥器備用。 


    1.2 主要試劑 


    無水乙醇、葡萄糖、苯酚、濃硫酸、碳酸鈉、濃氨水、過 氧化氫、丙酮、溴化鉀、硫酸亞鐵、氫氧化鉀、水楊酸、三(羥 甲基)氨基甲烷、鄰苯三酚,所有試劑均為市售分析純。 


    1.3 試驗儀器 


    試驗所需儀器如表 1 所示。

    222.png

    1.4 試驗方法 


    1.4.1 堿溶多糖提取流程 


    黃芪粉末→優化 1%氫 氧化鉀溶液提取的條件(提取溫度、提取時間、料液 比)→離心 (3 600 r·min-1 ,15 min)→合并上清液→ 100 ℃水浴濃縮至原體積 1/3→硫酸中和→透析→ 水浴濃縮→3 倍體積 95%乙醇醇沉過夜→無水乙 醇、丙酮離心洗滌(3 600 r·min-1 ,15 min)→干燥器 干燥→堿溶粗多糖→冷凍保存。 


    1.4.2 堿溶多糖紅外光譜檢測 


    分析天平稱取黃芪 堿溶多糖 2.0 mg,加入溴化鉀壓片后經傅立葉變換 紅外光譜儀在 4 000~500 cm-1 波數范圍內掃描。 


    1.4.3 堿溶多糖含量測定方法 


    采用苯酚硫酸法, 用分光光度計在 490 nm 波長處測定其吸光度,用回歸 方程計算出堿溶多糖含量,并計算其堿溶多糖得率。 (1)葡萄糖標準曲線的繪制。精確稱量干燥至恒 質量的無水葡萄糖于容量瓶中,定容。分別量取葡萄 糖標準溶液,制成一定濃度梯度于干燥試管中,補加 蒸餾水至相同體積,蒸餾水為空白,分別加 6%苯酚 0.5 mL,濃 H2SO4 2.5 mL,立即搖勻,室溫靜置 10 min 后于 490 nm 測定光吸收值,每個濃度平行做 3 次, 繪制葡萄糖濃度與吸收值之間的標準曲線。 (2)多糖含量測定。以堿溶多糖取代葡萄糖標準 溶液進行(1)試驗,測定 490 nm 吸光度,根據標準曲 線計算多糖含量,進一步獲得多糖得率,其計算公式 為:多糖得率(%)=多糖含量/原料質量×100 1.4.4 堿溶多糖提取工藝條件優化(1)堿溶多 糖提取單因素試驗。以 1%氫氧化鉀為溶劑,在其他條件相同的情況下,分別研究提取溫度、提取時間、 料液比 3 個因素對黃芪多糖提取率的影響。各因素 梯度設置詳見表 2。

    222.png

    (2)多糖提取的正交試驗。在上述單因素試驗的 基礎上,按 L934 設計正交表進行三因素三水平的正 交試驗,得出最佳提取條件。


    2 結果與分析


    在 3 438.24 cm-1 和 3 425.00 cm-1 處有締合的-OH 伸縮振動吸收峰,具有典型的-OH 吸收峰;在 1 900 cm-1 ~1 600 cm-1 ,具有羰基吸收 峰,證明是多糖。在提取溫度為 60 ℃、料液比為 1∶15 的條件下,研究提取時間對黃芪堿溶多糖提取率的 影響。在 50~130 min,多糖的提取率隨 提取時間的增加呈先升后降趨勢,堿溶多糖提取率 在 110 min 達到峰值,為 6.9%,與其他提取時間處理 差異顯著(P<0.05)。因此,提取時間選擇 110 min 較 為適宜。在 50~90 ℃,隨溫度的升高, 提取率呈先升后降的趨勢,在 60 ℃達到峰值,提取 率為 7.7%,與其他溫度處理差異顯著(P<0.05)。因 此,黃芪堿溶多糖的提取溫度選擇 60 ℃較為適宜。


    3 結論與討論


    采用不同的提取方法提取黃芪多糖,結果表明:提取方法 不同黃芪多糖提取率不同,但提取率均未超過 10%。梁子敬等、李海歐等分別采用超聲輔助提 取法和水回流提取法提取黃芪多糖,結果表明:黃芪 多糖提取率分別為 6.18%和 6.4%,兩者的提取率均 不高,但這兩種方法在提取過程中對黃芪有效成分 破壞程度小。李金芳采用水煎煮法確定的最佳提 取工藝為:提取時間 45 min、提取溫度 100 ℃、料液 比 1∶10、提取次數 3 次, 多糖提取率為 10.35%。劉永 錄等采用 NaOH 水溶液提取法:取黃芪藥材 400 g, 分別加 12 和 10 倍量 pH 值為 12 的 NaOH 水溶液 煎煮 2 次,經后續處理,黃芪多糖提取率為 7.73%。 本試驗采用堿提法通過單因素試驗和正交試驗對黃 芪堿溶多糖的提取工藝進行優化,在提取溫度 70 ℃、 提取時間 130 min、料液比 1∶20,堿溶多糖提取率達 (15.63±0.36)%,上海博迅醫療提高了黃芪的利用率及黃芪多糖的 提取率。





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