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    恒溫水槽對于凝血因子的質量和方法比較

    返回列表 來源:未知 發布日期:2019-09-11 10:48【

    冷沉淀 凝 血 因 子 ( 簡 稱 冷 沉 淀) 是 由 新 鮮 冰 凍 血 漿 ( FFP) 在 2-6℃ 水浴中解凍,收集到的白色絮狀物。冷沉淀 中主要含有凝血因子 FⅧ和纖維蛋白原,凝血因子是體內凝 血系統的主要成分,纖維蛋白原對促進創傷組織的修復和愈 合及抗感染方面起著重要的作用,其中國家標準 FⅧ 的含 量不少于 80 IU/袋,纖維蛋白原含量不少于 150 mg /袋。冷 沉淀是目前臨床上預防和治療出凝血功能障礙疾病的重要 血制品之一,適應證為甲型血友病及 FⅧ因子缺乏癥、血管 性假性血友病以及先天性或獲得性纖維蛋白缺乏導致的出 血、外科大手術及大出血,局部使用促進創口、潰瘍修復等。 冷沉淀凝血因子質量的差異直接影響治療效果。

    1 材料與方法

    1. 1 試劑與儀器

    ACL-700012 型貝克曼( 佛山沃塘) ,WTCⅡ型全自動冷沉淀制備儀,CT-4T. 6C 型血漿融化箱。用貝 克曼 ACL-7000 的原廠配套試劑分別對冷沉淀進行凝血因子 Ⅷ、纖維蛋白原的測定

    1. 2 標本

    2018 年 1 月-2018 年 12 月,從上海市血液中心 成分科低溫水浴融化箱制備的冷沉淀中抽取 48 例,2018 年 12 月-2019 年 6 月全自動冷沉淀制備儀制備冷沉淀,抽取 28 例,標本 HBsAg,抗-HCV,抗-HIV,抗-TP,核酸檢測,ALT 檢測 合格,無菌試驗陰性,ABO 血型反定型符合,標本外觀為淡黃 色澄清液體、無纖維蛋白析出、無黃疸、無氣泡、重度乳糜,容 器無破損、容量( 45±10) mL,保留至少長度 10 cm 的轉移管。

    1. 3 取樣方法

    隨機抽取-30℃保存的冷沉淀,檢測時將冷 沉淀置 37℃水浴中完全融化。

    1. 4 檢測方法

    用貝克曼 ACL-7000 的原廠配套試劑分別 對冷沉淀進行凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原的測定,以此為標本 嚴格按照 ACL-7000 全自動血凝儀的操作說明書和試劑說明 書進行檢測。

    1. 5 制備方法

    1. 5. 1 冷沉淀凝血因子制備儀法

    將 20 袋新鮮冰凍血漿 從-20℃低溫冰箱中取出,放入冷沉淀凝血因子制備儀中把 新鮮冰凍血漿置于 4℃恒溫循環水槽(上海博迅CY20超級恒溫油槽
    )中,空轉移袋懸掛于水 浴箱外的下掛盒內,且轉移袋的位置低于血漿袋,使兩袋之 間產生一定的落差,啟動制備儀,新鮮冰凍血漿沉沒于水槽 中與水完全接觸,打開轉移袋上的止流夾,蠕動泵運轉形成 虹吸,融化的血漿流入空袋中,當血漿袋中剩余 ( 46±1) g 血 漿及白色絮狀結晶時,機器閥門關閉,虹吸停止,機器報警提 示制備完成,關閉止流夾,取出血袋熱合封口,將制備好的冷 沉淀迅速放入血漿速凍機中速凍。整個制備過程大約需要 1 h 。


    1. 5. 2 血漿融化箱

    將 12 袋新鮮冰凍血漿從-20℃ 低溫冰 箱中取出,放入水溫恒定在 6℃ 的低溫融化箱里,將空轉移 袋懸掛在融化箱外,啟動融化箱,箱體自動前后搖擺,使血漿 袋與水充分接觸,當袋內的血漿開始有些融化時,打開轉移 空袋上的止流夾,擠出血漿袋中的空氣,使血漿袋中慢慢融 化的血漿能被虹吸到空轉移袋內,當袋內的血漿融化到剩余 45g±10%血漿及白色絮狀結晶時,關閉轉移袋上的止流夾, 從融化箱中取出冷沉淀,稱重熱合,將制備好的冷沉淀迅速 放入血漿速凍機中速凍。整個制備過程大約需要 1 h 。

    1. 6 質量標準

    根據中華人民共和國國家標準 GB18469- 2012《全血及成分血質量要求》中的規定,冷沉淀質量標準: 由 400 mL 全血制備的冷沉淀,纖維蛋白原含量≥150 mg,Ⅷ 因子含量≥80 IU。

    1. 7 統計學分析

    采用 SPSS17. 0 軟件的 t 檢驗,以 P<0. 05 為差異有統計學意義。

    2 結果( 表 1)


    3 討論

    根據國家標準,冷沉淀中凝血因子Ⅷ的含量不少于 80 IU/袋,纖維蛋白原含量不少于 150 mg /袋。血漿融化箱制備 冷沉淀中凝血因子Ⅷ的含量約 80. 8 - 317. 9 IU,平均值為 152. 08 IU; 纖維蛋白原含量約 190. 5 - 759. 6 mg,平均值為 373. 02 mg,全自動冷沉淀制備儀制備冷沉淀中凝血因子Ⅷ 的含量約 80. 2-326. 7 IU,平均值為 181. 3 IU; 纖維蛋白原含 量約 209. 1-880. 2 mg,平均值為 424. 8 mg,均達到了國家標 準。冷沉淀中凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原的回收率與抗凝劑、 全血保存時間和融化溫度等因素有關,且冷沉淀中的 FⅧ為 不穩定因子,受多種因素影響,所以每袋冷沉淀 FⅧ含量各 不相同,據報道正常個體中凝血因子 FⅧ水平相差在 50% - 200%之間。




     


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